자기 순환 DNA 맥시 키트 V2

A-1 시작 샘플의 낮은 농도의 세포 또는 바이러스 - 세포 또는 바이러스의 농도를 농축합니다.

A-2 샘플의 불충분한 용해 - 샘플이 용해 버퍼와 완전히 혼합되지 않았습니다. 1~2회 Pulse-vortexing하여 충분히 혼합하는 것이 좋습니다. - proteinase K의 활성저하로 인한 세포 용해 부족. - 따뜻한 목욕 시간 부족으로 인한 세포 용해 부족 또는 단백질 분해 조직을 작은 조각으로 자르고 목욕 시간을 연장하여 용해물의 모든 잔류물을 제거하는 것이 좋습니다.

A-3 불충분한 DNA 흡착. - 용해물을 스핀 컬럼으로 옮기기 전에 에탄올을 첨가하지 않았거나 100% 에탄올 대신 낮은 비율로 첨가했습니다.

A-4 elution buffer의 pH 값이 너무 낮습니다. — pH를 8.0-8.3 사이로 조정합니다.

용리액에 잔류 에탄올.

- 용리액에 잔류 세척 버퍼 PW가 있습니다. 에탄올은 스핀 컬럼을 3-5분 동안 원심분리한 다음 실온 또는 50℃ 인큐베이터에 1-2분 동안 두어 제거할 수 있습니다.

A-1 샘플이 신선하지 않습니다. — 샘플의 DNA가 분해되었는지 여부를 확인하기 위해 대조군으로 양성 샘플 DNA를 추출합니다.

A-2 부적절한 전처리. —과도한 액체 질소 분쇄, 수분 회복 또는 너무 많은 양의 샘플로 인해 발생합니다.

전처리는 샘플마다 달라야 합니다. 식물 샘플의 경우 액체 질소로 철저히 분쇄해야 합니다. 동물 샘플의 경우 액체 질소에서 균질화하거나 완전히 분쇄합니다. G+ 박테리아 및 효모와 같이 부서지기 어려운 세포벽을 가진 샘플의 경우 세포벽을 파괴하기 위해 리소자임, lyticase 또는 기계적 방법을 사용하는 것이 좋습니다.

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit는 추출을 위해 클로로포름이 필요한 컬럼 기반의 방법을 채택하고 있습니다. 다양한 식물 샘플 및 식물 건조 분말에 특히 적합합니다. Hi-DNAsecure Plant Kit도 컬럼 기반이지만 페놀/클로로포름 추출이 필요하지 않아 안전하고 무독성입니다. 다당류와 폴리페놀 함량이 높은 식물에 적합합니다. 4992709/4992710 DNAquick Plant System은 액체 기반 방법을 채택합니다. 페놀/클로로포름 추출도 필요하지 않습니다. 정제 절차는 샘플 시작량에 대한 제한이 없이 간단하고 빠르므로 사용자는 실험 요구 사항에 따라 양을 유연하게 조정할 수 있습니다. 큰 크기의 gDNA 단편을 높은 수율로 얻을 수 있습니다.

게놈 DNA는 TIANamp 혈액 DNA 키트에 의해 다양한 양의 인간 전혈 샘플에서 추출되었습니다. 결과는 다음과 같습니다. 결과는 참고용으로만 나열되며 실제 추출 결과는 샘플의 조건에 따라 다릅니다.

혈병 DNA 추출은 프로토콜을 혈병 DNA 추출에 대한 특정 지침으로 변경하기만 하면 이 두 키트에 제공된 시약을 사용하여 수행할 수 있습니다. 혈액 응고 DNA 추출 프로토콜의 소프트 카피는 요청 시 발행될 수 있습니다.

1 ml PBS, 생리 식염수 또는 TE 완충액으로 신선한 샘플을 일시 중단합니다. 균질기로 시료를 완전히 균질화하고 원심분리하여 침전물을 튜브 바닥에 모은다. 뜨는을 처분하고 200 μl 버퍼 GA로 침전물을 재현 탁합니다. 지시에 따라 다음과 같은 DNA 정제를 수행할 수 있습니다.

혈장, 혈청 및 체액 시료의 gDNA 정제에는 TIANamp Micro DNA Kit를 권장합니다. 혈청/혈장 샘플에서 바이러스 gDNA를 정제하려면 TIANamp 바이러스 DNA/RNA 키트를 권장합니다. 혈청 및 혈장 샘플에서 박테리아 gDNA를 정제하려면 TIANamp Bacteria DNA Kit를 권장합니다(양성 박테리아의 경우 리소자임 포함). 타액 샘플의 경우 Hi-Swab DNA Kit와 TIANamp Bacteria DNA Kit를 권장합니다.

DNAsecure Plant Kit 또는 DNAquick Plant System은 곰팡이 게놈 추출에 권장됩니다. 효모 게놈 추출의 경우 TIANamp Yeast DNA Kit를 권장합니다(lyticase는 자체 준비해야 함).